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人補體1q(C1q)elisa試劑盒注意事項

瀏覽次數(shù):1044發(fā)布日期:2022-09-01

人補體1q(C1q)elisa試劑盒操作步驟


1. 標(biāo)準品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

高遷移率族蛋白1(HMG1)重組蛋白

睪素2(TIC2)重組蛋白

谷氨酸半胱氨酸連接酶(GCLM)重組蛋白

谷氨酸脫羧酶2(GAD2)重組蛋白

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)重組蛋白

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶α1(GSTα1)重組蛋白

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶α3(GSTα3)重組蛋白

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶α4(GSTα4)重組蛋白

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶θ1(GSTθ1)重組蛋白

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶κ1(GSTκ1)重組蛋白

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶μ2(GSTμ2)重組蛋白

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶π1(GSTπ1)重組蛋白

骨保護素(OPG)重組蛋白

骨成型蛋白2(BMP2)重組蛋白

骨成型蛋白4(BMP4)重組蛋白

骨成型蛋白7(BMP7)重組蛋白

骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)重組蛋白

骨成型蛋白受體1B(BMPR1B)重組蛋白

骨鈣素(OC)重組蛋白

骨橋素(OPN)重組蛋白

骨涎蛋白(BSP)重組蛋白

骨形成蛋白6(BMP6)重組蛋白


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